乳酸脫氫酶誘導(dǎo)顳下頜關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)病動物模型

(1)復(fù)制方法  體重為2.0～2.5kg，經(jīng)檢查無牙頜畸形的雌性成年新西蘭兔，按1mg/kg體重的劑量經(jīng)耳緣靜脈注射2.5g/L的戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉后，無菌條件下只在雙側(cè)顳下頜關(guān)節(jié)(temporomandibular joint, TMJ)作關(guān)節(jié)上腔穿刺，低濃度組在雙側(cè)TMJ上腔均注射100U LDH(用0.9％生理鹽水配制)0.1ml；高濃度組只在雙側(cè)TMJ上腔均注射200單位LDH 0.1ml。穿刺或注射后分別于24h，1、4、8、12周行過量注射麻醉藥方法處死動物，取顳下頜關(guān)節(jié)標本觀察。 TMJ穿刺方法在兔子外眥后下方可捫及兩個小結(jié)節(jié)，分別為眶下緣和髁突后極。作TMJ穿刺時，在兩個小結(jié)節(jié)之間進針，針頭指向前、內(nèi)、下，均與眶下緣平行，進針約0.5cm后，可有脫空感，回抽無血，偶爾有少許黏稠淡黃色液體，即關(guān)節(jié)液，注射藥物后可回抽，此時表明針尖在TMJ腔內(nèi)。

(2)模型特點  模型動物各個時間段關(guān)節(jié)病變程度有所不同，高濃度組病變程度均較低濃度組病變嚴重。光學(xué)顯微鏡下：早期(1～4周)未見明顯病變。后期(4～12周)，纖維軟骨層變薄，纖維軟骨各層結(jié)構(gòu)排列紊亂，關(guān)節(jié)盤膠原纖維玻璃樣變性，滑膜增厚細胞成分增多，部分區(qū)域骨質(zhì)暴露，髁突部分區(qū)域骨質(zhì)變性，關(guān)節(jié)盤膠原纖維變性，斷裂。掃描電鏡下早期(1～4周)關(guān)節(jié)各結(jié)構(gòu)表面未見明顯異常。后期(4～12周)，關(guān)節(jié)盤上表面凝膠層變薄，網(wǎng)狀的膠原纖維暴露，凝膠層物質(zhì)脫落，關(guān)節(jié)盤表面波紋變淺，甚至消失，髁突表面波紋變淺，凝膠層剝脫，網(wǎng)狀膠原纖維絲暴露，大量膠原纖維束卷起裸露，在髁突前斜面功能區(qū)，波紋結(jié)構(gòu)消失，凝膠層變薄。大量膠原纖維絲暴露。模型動物均于注射后4周出現(xiàn)特征性骨關(guān)節(jié)病病損，并可隨時間推移而加重。

(3)比較醫(yī)學(xué)  本模型采用病理組織學(xué)、掃描電鏡等研究手段，對模型動物各時間段關(guān)節(jié)軟骨關(guān)節(jié)盤病變進行了觀察，發(fā)現(xiàn)病變損傷與其他方法如腫瘤壞死因子(TNF)、牙合創(chuàng)傷等引起的關(guān)節(jié)損害相似，說明本模型制作方法具有良好的可比性，符合動物模型的基本要求。由于未觀察到模型動物的關(guān)節(jié)盤有穿孔現(xiàn)象，說明本模型的關(guān)節(jié)病變處于早、中期，因此所建立的動物模型適用于早、中期關(guān)節(jié)病變的實驗研究。采用本方法誘導(dǎo)的兔TMJ OA模型，制作方法簡便易行，病變典型，且兔及乳酸脫氫酶均容易獲得，價格適宜，是較為理想的動物模型。