技術(shù)文章
Technical articles近年來隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，出現(xiàn)了許多克隆新基因的方法和手段，如圖譜克隆技術(shù)、轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽技術(shù)、mRNA差異顯示技術(shù)二基因組減法技術(shù)以及cDNA文庫篩選技術(shù)等。但上述方法人多具有實(shí)驗(yàn)周期長、技術(shù)步驟煩瑣且工作量大等特點(diǎn)。cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)（rapidamplificationofcDNAends，RACE）是一種基于PCR從低豐度的轉(zhuǎn)錄本中快速擴(kuò)增cDNA的5'和3'末端的有效方法，以其簡單、快速、廉價等優(yōu)勢而受到越來越多的重視.經(jīng)典的RACE技術(shù)是由Frohman等（...
每當(dāng)拿到一個質(zhì)粒圖譜，是不是一下就有點(diǎn)懵了？這些ori、RBS、tet是什么？這些箭頭代表什么，轉(zhuǎn)錄的方向嗎？不要著急，申知心生物把這些告訴你，也許會解決你的困惑。質(zhì)粒和載體傻傻分不清楚質(zhì)粒(Plasmid)是附加到細(xì)胞中的非細(xì)胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復(fù)制的較小的DNA分子(即細(xì)胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質(zhì)粒雖然都是環(huán)狀構(gòu)型。載體即要把一個有用的基因（目的基因——研究或應(yīng)用基因）通過基因工程手段送到生物細(xì)胞（受體細(xì)胞），需要運(yùn)載工具（交通工具）攜帶外源基因進(jìn)...
RTPrimer的佳選擇通常RTprimer可分為三類：oligodT，隨機(jī)引物以及基因特異性引物。OligodT引物之所以應(yīng)用范圍更加廣泛，是因?yàn)榭捎纱双@得mRNA的全長拷貝。然而如果mRNA長度過長4kb，或者沒有polyA尾（原核mRNA或rRNA），就需要考慮使用隨機(jī)引物進(jìn)行RNA的反轉(zhuǎn)錄。隨機(jī)引物雖能長基因的5’末端的轉(zhuǎn)錄，但并不能獲得整個基因全長的cDNAs，且對RNA樣品質(zhì)量要求比較高，此時可用6-8個核酸聚合體來提高cDNAs的合成量。而對于真核生物的qPCR...
對于Elisa試劑盒的使用，總有解不完的疑問，比如說加樣器不確；特別10ul以下的加樣器，對成果影響；保溫設(shè)備不良；洗刷用水不規(guī)范。如何解決這些疑問呢：1、加樣不；沒有混勻。加樣時必定要細(xì)心。加樣后，再查看，以防漏加、錯加。2、加樣后，重復(fù)抽吸3次混勻，防止血清集合孔底，致使非特異性吸附。洗刷洗刷不①每次灌水洗刷，應(yīng)停止30秒鐘；②選用吸水紙作為襯墊，每次洗刷后扣干孔內(nèi)水分；3、可選用塑料洗刷瓶。加酶反響漏加滴加后，細(xì)心查看各孔成果判別①包含陰性對照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深；...
臨淵羨魚階組里的前輩們看起來個個都是牛人，各有各的事業(yè)，可是喂~誰來提挈小生則個！導(dǎo)師：“在咱們這個組的大框架下自己找個坑填上去~”——坑在哪？師姐：“問我問題之前不能先自己查一下嘛？你這個問題明明有現(xiàn)成答案呀~”——上哪查師兄：“去去去，小孩子一邊看文獻(xiàn)去！”——看不懂~_看什么文獻(xiàn)，怎么看？專業(yè)術(shù)語不懂怎么辦？好吧，大不了啃字典，先把組里發(fā)過的文章都過一遍好了。終于有一天組會討論時，哇我居然聽懂了躍躍欲試階已經(jīng)能相當(dāng)熟練地在知網(wǎng)、NCBI等數(shù)據(jù)庫上查到自己想要的信息了，儀...
雖然說內(nèi)科和外科都是相親相愛的一家人，但是細(xì)數(shù)一下，兩者之間還是有一些有趣的差別，看看網(wǎng)友們是如何總結(jié)的。區(qū)別一：內(nèi)科大夫多話癆皇上：此番遼國起傾國之力，那蕭皇后親率三十萬大軍南下，諸位愛卿如何是好？內(nèi)科大臣:啟稟皇上，臣以為還當(dāng)細(xì)細(xì)打探方能定奪，不宜早下決定。究竟是蕭皇后親征，還是南院大王統(tǒng)帥？又或者是其他將領(lǐng)？這分型應(yīng)當(dāng)明確。三十萬兵力應(yīng)當(dāng)有所鑒別，據(jù)臣所知遼國連續(xù)三年大旱，北方更有金人犯境，能聚三十萬兵力實(shí)在存疑，打個問號。遼國大軍南下，是分兵幾路？每路兵馬幾何？還需完...
一、WesternBlot實(shí)驗(yàn)為什么要用內(nèi)參?WesternBlot實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行內(nèi)參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達(dá)量的相對多少，前提條件是等量的組織細(xì)胞蛋白上樣，才有比較的基礎(chǔ)，特別是表達(dá)量不高時，上樣量的的差別就很有可能影響結(jié)果的分析。因此，在WesternBlot試驗(yàn)中，進(jìn)行內(nèi)參的檢測，有以下兩點(diǎn)作用：1、校正蛋白質(zhì)定量、上樣過程中存在的誤差，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性；2、使用內(nèi)參可以作為空白對照，檢測蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否、整個WesternBlot顯色發(fā)光體系是否正常。二、你的內(nèi)...
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