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技術文章

Technical articles

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  • 20178-17
    免疫沉淀實驗

    一、服務介紹免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是指利用抗體與抗原間的特異性結合特性,將抗原(我們感興趣的靶蛋白)-抗體復合物從樣品中分離出來,達到初步分離純化靶蛋白的目的。之后,樣品可以再進行Westernblot分析。二、實驗原理免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應達到純化,定性檢測蛋白的目的,即在蛋白質提取液中加入與抗原(靶蛋白質)特異性結合的抗體,抗體與抗原結合后形成免疫復合物,再與蛋ProteinA/G或二抗偶聯(lián)的瓊脂糖珠子孵育,通過離心得到免疫復合...

  • 20178-16
    PAS染色法實驗

    一、服務介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應使呈現(xiàn)紫紅色。隨著醫(yī)學實驗技術的發(fā)展,糖原染色應用的范圍更加廣泛,如用以證明與鑒別細胞內空泡狀的性質,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些腫瘤的診斷等。二、實驗原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質。過...

  • 20178-10
    高質量RNA提取條件之二

    1.選擇好的RNA分離方法現(xiàn)有眾多的RNA分離方法也許令人難以取舍。目前簡單也是安全的方法是柱式分離,如RNApure因為操作簡單,時間短,純度高而受到大家的喜愛,RNApure不需要DNA酶消化DNA,節(jié)省了時間,避免RNA的降解,從而提高了產(chǎn)量;相對非柱式分離(如TRIZOL),去除蛋白及其他雜質干凈,提高了純度,對于細胞、組織、一般植物均非常適合。植物RNA的提取比較難抉擇,植物RNA提取受酚、多糖、蛋白雜質、次生代謝物含量的影響,一般用TRIZOL提取純度不高,而且很...

  • 20178-9
    高質量RNA提取條件之一

    1.迅速滅活內源的RNA酶,以防止RNA降解。以下3個方法均可有效使內源RNA酶失活:1)用含離液(如胍鹽)的細胞裂解液收獲樣品,并立即勻漿。2)用液氮瞬間凍結樣品。值得特別注意的是:組織塊足夠小,在浸入液氮的瞬間就能凍結,以瞬間令RNA酶失活。3)立即將樣品置于RNAfixer無液氮RNA樣品儲存液中。它是一種水相、無毒的收集試劑,能立即穩(wěn)定并保護完整、未凍結的組織和細胞樣品中的RNA。關鍵要點是組織樣品切片要夠?。ǎ@樣RNAfixer才能在RNase破壞RNA之前迅速...

  • 20178-8
    Elisa試劑盒試驗過程中需要特別注意的細節(jié)

    Elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)、已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。Elisa試劑盒試驗過程中需要特別注意的細節(jié)1、試劑準備:試劑都在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中使用一次性吸頭,避免交叉污染;2.加樣:加樣時,...

  • 20178-3
    血清的保存方式

    血清的保存應該注意以下幾點:(1)生物學實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,預留體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已解凍的血清。生物學實驗中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量。補體...

  • 20177-27
    結締組織類細胞培養(yǎng)

    一、成纖維細胞培養(yǎng)用人或動物胚體為好;動物可用小鼠或雞胚,去頭和內臟,剪成小碎塊后,用胰蛋白酶消化法培養(yǎng);如為人胚,可取皮膚培養(yǎng)。幼兒包皮是培養(yǎng)成纖維細胞的很好對象。二、巨噬細胞培養(yǎng)1.實驗前三天,向每只小鼠腹腔內注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內)。2.引頸殺死動物,手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3~5秒。3.置動物于解剖臺上,用針頭固定四肢,雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側,暴露出腹膜,但勿傷及腹膜壁。4.再用70%酒精擦洗腹膜壁后,用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中,...

  • 20177-26
    動物交際實驗

    一、動物交際實驗原理:動物交際實驗利用小鼠熟悉了環(huán)境后,檢測小鼠靠近位于實驗箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時間,來判斷小鼠的社交能力。二、動物交際實驗參數(shù)指標:活動距離、運動速度、測試時間區(qū)域指標各區(qū)域運動路程、逗留時間、靜止時間各區(qū)域(左區(qū)域、右邊區(qū)域、中央?yún)^(qū)域)次進入時間、進入次數(shù)長訪問時間、短訪問時間、進入前總路程、次離開時間特色指標束縛鼠間的接觸次數(shù)、接觸持續(xù)時間、次接觸時間、接近時間與束縛鼠間距離、與束縛鼠間小距離。

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